21.解析:(1)引物与模板进行碱基配对,已知其中一个引物序列为5'-TGCGCAGT-3,结合图2可知,另一个引物序列为5'-AGCTAGCA-3'。在PCR扩增过程中,引物与两条单链DNA结合时的温度一般要控制在50℃左右,比变性温度低。(2)根据图3和图4可知,酶切后序列左侧的黏性末端只有被NhI切割后才能形成,右侧的黏性末端只有被C∫0I切割后才能形成,因此科研人员选择的限制酶是NheI、CfoI。(3)由图1可知,CD163基因在RFP基因前面,除去CD163基因中编码终止密码子的序列,可以使拼接后的重组基因表达成一条多肽,形成融合蛋白。(4)转录时mRNA的延伸方向为5′→3',又因启动子在左端,因此以b链为转录模板;翻译时,RFP蛋白与CD163蛋白合成的顺序是先合成CD163蛋白,再合成RFP蛋白。答案:(除注明外,每空2分,共13分)(1)AGCTAGCA低于(1分)(2)NheI、CfoI酶切后序列左侧的黏性末端只有被NheI切割后才能形成,右侧的黏性末端只有被CfoI切割后才能形成(3)终止密码子(4)b先合成CD163蛋白,再合成RFP蛋白